作者：郑永晨; 曹岩; 王瑞细胞周期蛋白依赖性激酶4原核表达
摘要：目的 从人肝癌组织细胞中克隆人CDK4基因和原核表达CDK4蛋白.方法 用逆转录PCR方法从人肝癌组织RNA中扩增出CDK4 cDNA,然后与T载体和PET28a＋载体重组,转化受体菌和诱导表达,DNA序列分析和Western blot鉴定重组质粒和蛋白表达.结果 PCR扩增出900 bp的DN段,与T载体和PET28a＋载体重组得到人CDK4基因的重组质粒,DNA序列显示为人CDK4的cDNA全序列;IPTG可以诱导重组菌表达蛋白;Western blot结果表明为人CDK4蛋白.结论 用逆转录PCR方法扩增出人CDK4 cDNA,并与PET28a＋载体重组得到能够用IPTG诱导表达的人CDK4蛋白.
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