中药胡椒碱在终板软骨细胞退变中的保护作用的研究

作者：高智; 徐宏光; 张晓玲; 王弘; 马明明; 肖...胡椒碱终板软骨细胞间歇性循环牵张力基质金属蛋白酶13

摘要：目的：探讨中药胡椒碱对椎间盘终板软骨细胞退变的保护作用。方法：分离获取大鼠终板软骨细胞,体外培养建立终板软骨细胞加力退变模型。设空白对照组（未加力细胞）、加力组（10%间歇性循环牵张力,10%ICMT,0.5 Hz,8 h/d,加力3 d）及加力加药物组（加力组中加入中药胡椒碱40μmol/L）。倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,甲苯胺蓝染色鉴定细胞表型。实时聚合酶链反应检测各组细胞中SOX-9基因,II型胶原,蛋白聚糖,MMP13的表达情况,核质分离及免疫印迹检测胞核与胞质中NF-κB信号通路相关蛋白P65、p-P65表达变化。结果：细胞体外加力后表型丢失,甲苯胺蓝染色可见细胞外基质减少,加力加药组细胞外基质未见明显减少。加力组细胞（ICMT）较空白对照组细胞（NC组）SOX-9（ICMT/NC=0.22,P〈0.01）、蛋白聚糖（ICMT/NC=0.15,P〈0.01）、II型胶原（ICMT/NC=0.18,P〈0.01）表达明显降低,NF-κB信号通路相关基因P65入核增加,NF-κB信号通路相关基因MMP13（ICMT/NC=1.68,P〈0.05）表达明显上升。40μmol/L胡椒碱处理的加力加药组较加力组细胞核内p-P65减少,NF-κB信号通路相关基因MMP13（40μmol/L胡椒碱/ICMT=0.70,P〈0.05）表达降低,40μmol/L胡椒碱处理的加药加力组中II型胶原（40μmol/L胡椒碱/ICMT=1.93,P〈0.05）、蛋白聚糖（40μmol/L胡椒碱/ICMT=1.78,P〈0.05）、SOX-9（40μmol/L胡椒碱/ICMT=1.70,P〈0.05）等基因表达明显回升。结论：中药胡椒碱可以抑制椎间盘终板软骨细胞的退变发生,从而起到对椎间盘及终板软骨的保护作用。

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