慢病毒介导shRNA干扰前列腺癌PC3细胞Keap1基因表达的研究

作者：王天珩; 吴欣俐; 刘晓平keap1shrna慢病毒pc3细胞

摘要：目的：针对Keap1构建shRNA慢病毒干扰载体，并评价慢病毒介导的RNA干扰在人前列腺癌细胞PC3中的基因沉默效应。方法：利用生物信息学方法设计针对Keapl的RNAi寡聚核苷酸序列；采用慢病毒载体构建Keapl的shR-NA载体，利用大肠杆菌进行重组表达，利用293T细胞包装得到重组腺病毒；依据绿色荧光蛋白（GFP）示踪，逐孔稀释法确定转染效率及滴度；以实时荧光定量法比较各靶序列的基因干扰效果。结果：筛选了所构建的4个Keapl靶向序列，以慢病毒载体构建完成对应Keapl的shR-NA质粒。通过瞬时转染筛选得到效率最佳（干扰效率达到80％）的靶序列和工作条件。结论：本研究成功构建并筛选了针对Keapl的shRNA慢病毒载体，有效抑制PC3细胞中Keapl的表达。

注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社