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长链非编码RNA H19与高级别脑胶质瘤替莫唑胺抵抗的关系及其相关机制研究

作者:徐鹏翔; 李强; 许琼冠; 张彩彩长链非编码rnah19高级别脑胶质瘤替莫唑胺化疗抵抗

摘要:目的探究长链非编码RNA H19(LNC H19)与胶质瘤细胞替莫唑胺(TMZ)抵抗的关系。方法收集正常脑组织(正常组)、初发(初发实验组)及复发高级别脑胶质瘤的组织样本(复发实验组)。以1,2,4,8μg·m L~(-1)TMZ分别诱导U251细胞并维持正常生长1周,构建抵抗U251 TMZ抵抗细胞系(U251-TR),U251细胞以等体积的0.9%Na Cl处理,逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)检测组织及细胞中LNC H19的表达以及细胞中06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)mRNA的表达。慢病毒转染构建稳定干扰LNC H19的U251-TR细胞系(U251-TRsi LNC H19),以MTT法验证U251-TR细胞并观察细胞TMZ半抑制浓度(IC_(50)值)的变化;以免疫印迹技术检测细胞中MGMT蛋白的表达。结果复发实验组、初发实验组和正常组的LNC H19表达量分别为0.26±0.02,0.19±0.01,0.12±0.02,组间比较差异均有统计学意义(均P〈0.01)。U251-TR及U251细胞IC_(50)值分别为(10.2±1.3),(2.8±0.2)μg·m L~(-1),组间比较差异有统计学意义(P〈0.01)。U251-TR si LNC H19细胞和U251-TR细胞TMZ的IC_(50)值分别为(6.1±0.6),(10.7±1.5)μg·m L~(-1),组间比较差异有统计学意义(P〈0.01)。U251-TR和U251细胞LNC H19表达分别为0.08±0.01,0.03±0.01,U251-TR和U251细胞MGMT mRNA表达分别为0.57±0.11,0.31±0.07,组间比较差异均有统计学意义(均P〈0.01)。U251-TR和U251细胞MGMT蛋白表达水平分别为(0.85±0.16),(0.27±0.07)DPI,组间比较差异有统计学意义(P〈0.01)。结论 LNC H19是促进TMZ抵抗的关键因子。

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