作者：郭琳; 鲁美钰; 周玲; 李敏; 刘玉伟; 杜滨...血管内皮生长因子热休克蛋白70分子佐剂蛋白疫苗肝癌
摘要：目的研究两段重复的热休克蛋白70（mHSP70）407-426序列（2mHSP70_（407-426）,M_2）能否增强血管内皮生长因子（VEGF）融合蛋白疫苗抗肿瘤活性。方法以加端PCR方式,将M_2以柔性肽连接于hVEGF121突变体1的C末端,得到hVEGF121突变体2蛋白。用H22肝癌细胞构建荷瘤肝癌小鼠模型。24只小鼠按照体重随机分为3组：模型组,实验1组（hVEGF121突变体1蛋白80μg）及实验2组（hVEGF121突变体2蛋白80μg）。以酶联免疫吸附法检测免疫小鼠血清中的抗体水平,以脾淋巴细胞增殖实验检测免疫小鼠细胞免疫应答水平,以皮内肿瘤血管模型考察蛋白疫苗抗血管生成活性。结果实验1组与实验2组的瘤重分别为（1.58±0.28）,（1.17±0.25）g,与实验1组比较,实验2组差异有统计学意义（P〈0.05）。实验1组与实验2组的小鼠免疫血清中抗-VEGF抗体分别为0.54±0.09,0.74±0.1,与实验1组比较,实验2组小鼠免疫血清中检测到更高滴度的抗-VEGF抗体,差异有统计学意义（P〈0.01）。实验1组与实验2组的刺激脾淋巴细胞的增殖活性分别为0.26±0.03,0.36±0.04,与实验1组比较,实验2组疫苗免疫能够更有效地刺激脾淋巴细胞的增殖,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 M_2作为分子佐剂可以有效增强VEGF融合蛋白疫苗的抗肿瘤活性。
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