作者：黄梦怡; 钟玙沄; 黄穗; 孙江; 李月; 王娟...setd4基因敲除
摘要：目的利用FLP/FRT、Cre/Loxp重组酶系统构建并鉴定髓样细胞特异性SETD4基因敲除小鼠,为深入研究SETD4的生物学功能奠定基础。方法将引进的Setd4^flox/＋小鼠自交,筛选出子代基因型为Setd4^flox/flox的小鼠;与FLP小鼠交配,得到Setd4^fl/＋/flp小鼠;然后分别与C57BL/6小鼠交配去除FLP酶,筛选出Setd4^fl/＋小鼠;与Lyz2-Cre小鼠交配,筛选出Setd4^fl/＋/Lyz2-Cre小鼠;将得到的Setd^4fl/＋和Setd4^fl/＋/Lyz2-Cre小鼠交配,筛选出Setd4^-/-/Lyz2-Cre小鼠,即髓样细胞特异性SETD4基因敲除小鼠。利用PCR技术鉴定小鼠基因型;实时荧光定量PCR技术检测小鼠腹腔巨噬细胞及肝组织中SETD4的mRNA表达水平验证敲除情况。结果髓样细胞特异性SETD4基因敲除小鼠腹腔巨噬细胞中SETD4 mRNA水平较野生型小鼠显著降低;而在肝组织中无显著差异。结论利用FLP/FRT、Cre/Loxp系统成功构建髓样细胞特异性SETD4基因敲除小鼠,为后续的功能学研究提供了动物模型。
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