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天然抗生素肽elafin与铜绿假单胞菌的相互作用

作者:聂晓红; 周向东; 黄长武elafin铜绿假单胞菌气道上皮细胞

摘要:目的 观察天然抗生素肽elafin与铜绿假单胞菌的相互作用。方法 体外细胞培养气道上皮A549细胞,将已构建好elafin克隆载体通过脂质体转染系统转染到A549细胞中,空质粒载体作为其对照,倒置荧光显微镜观察转染效果。空载体转染A549细胞(正常组)以及转染后的A549细胞分别用细胞培养液(对照组)和铜绿假单胞菌上清液(实验组)继续孵育24h。用ELISA法检测每组细胞上清液中elafin水平,Western Blot法检测细胞内elafin含量;孵育24h后,每组上清液取1ml加入到铜绿假单胞菌菌悬液中培养24h,用倍比稀释法测细菌数量。结果 对照组细胞的上清液中elafin水平(2.93±0.41)和细胞内elafin蛋白含量(0.23±0.05),与正常组[(1.24±0.23)和(0.12±0.03)]有显著差异(均为P〈0.01)。上述指标实验组[(8.54±0.99)和(0.74±0.18)]与对照组相比明显增加(均为P〈0.01);对照组细胞上清液中细菌数量[(5.62±0.75)×10^6/ml]与正常组细胞上清液中的[(6.78土0.98)×106/ml]也有差异(P〈0.05),实验组[(3.26±0.53)×10^6/ml]与对照组相比细菌数明显减少(P〈0.01)。细胞上清液中elafin水平与细菌数呈一定的负相关(r=-0.59,P〈0.05)。结论 铜绿假单胞菌能诱导elafin产生,反之elafin亦有一定的杀铜绿假单胞菌作用。

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