作者：梁建琴; 吴雪琼; 曹立雪; 李洪敏; 张俊仙结核分枝杆菌链霉素rpsl基因rrs基因药物耐受性聚合酶链反应膜芯片
摘要：目的应用复合聚合酶链反应(复合PCR)-膜芯片技术快速检测结核分枝杆菌对链霉素(SM)的耐药性.方法设计与合成用于检测结核分枝杆菌耐SM基因rpsL和rrs的寡核苷酸探针制作膜芯片,与结核分枝杆菌分离株生物素标记的rpsL和rrs基因复合PCR产物进行反向斑点杂交,并与PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)和PCR-直接测序(PCR-DS)结果比较.结果52株结核分枝杆菌临床分离株中,9株敏感株rpsL和rrs基因的SSCP图谱、膜芯片杂交结果与标准株完全相同;43株耐SM菌株中,33株存在rpsL基因43位密码子AAG→AGG突变,5株有rrs基因513位A→C突变,1株有rrs基因513位A→T突变,突变率为90.7%.结论膜芯片技术检测结核分枝杆菌耐SM基因型灵敏度高、特异性强、简便、快速,可用于临床耐药性检测.
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