作者：田男细胞生物学耐药紫杉醇lin28bhep3b细胞株
摘要：为证明Lin28B/let-7通路与肝癌紫杉醇耐药密切相关和采用浓度梯度间歇刺激法建立Hep3B/PTX耐药细胞系。通过四甲基偶氮唑盐比色（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）分析Guava微流式分析对Hep3B/PTX耐药细胞系进行鉴定,realtime PCR检测耐药细胞中Lin28B及let-7表达水平。经过6个月的诱导,Hep3B/PTX耐药细胞系对紫杉醇的耐药指数为13.55;与亲本细胞相比,Hep3B/PTX处于G0/G1期的细胞比例较高,S期的细胞比例较低;0.2μmol/L紫杉醇处理亲本细胞24h后,有（41.73±1.80）%细胞发生凋亡,而Hep3B/PTX细胞凋亡率只有（17.21±3.60）%;real-time PCR发现,Hep3B/PTX与亲本细胞相比,Lin28B基因表达水平升高了49倍,而Lin28B调控的let-7家族成员表达水平均有不同程度的降低。Hep3B/PTX细胞中Lin28B基因和let-7家族成员表达量的变化揭示了肝癌细胞对紫杉醇的耐药与Lin28B/let-7通路相关,Lin28B基因可能通过影响let-7家族miRNA生物发生过程而改变肝癌细胞对紫杉醇的敏感性。
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