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过表达Bcl-2雪旺细胞抗凋亡能力的实验研究

作者:葛成国; 靳凤烁; 李黔生; 江军; 李彦锋; ...基因表达雪旺细胞抗凋亡能力细胞凋亡逆转录病毒

摘要:目的:探讨凋亡相关基因Bcl-2过表达对抗过氧化氢诱导的雪旺细胞凋亡的影响.方法:构建含有人Bcl-2cDNA的逆转录病毒真核表达载体PLXSN,脂质体法将重组质粒转染PA317细胞,G418筛选阳性克隆,鉴定后浓缩收集病毒液,感染人雪旺细胞株系Schwann's cells,采用Western法检测Bcl-2蛋白表达情况.5mM H2O2作用并诱导细胞凋亡后,流式细胞仪检测细胞凋亡发生变化.结果:成功构建出含目的基因Bcl-2的逆转录病毒表达载体pLBcl-2SN.5mM H2O2成功的诱导雪旺细胞凋亡.Bcl-2逆转录病毒感染雪旺细胞后,Bcl-2蛋白水平呈过高表达,并能显著对抗H2O2诱导的雪旺细胞凋亡.结论:Bcl-2蛋白过表达能够抑制氧化剂诱导的雪旺细胞凋亡.

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