作者：张婷婷; 李雪萍低强度脉冲超声吡格列酮骨关节炎脂多糖
摘要：目的：探讨低强度脉冲超声（LIPUS）和吡格列酮对脂多糖（LPS）诱导的骨关节炎（OA）软骨细胞经雷帕霉素靶蛋白（mTOR）途径的软骨保护作用比较。方法：于新西兰大白兔膝关节软骨提取正常软骨细胞,分别进行体外培养并按数字表法随机分为4组：正常组、LPS组、LIPUS组（LPS＋LIPUS）、吡格列酮组（LPS＋吡格列酮,Pioglitazone组）各6只。LIPUS干预选取40mW/cm2强度,每次照射20min,1次/d,共7d。Pioglitazone组的软骨细胞在含有100uM吡格列酮培养基中连续培养7d。于第7天应用CCK-8检测各组软骨细胞增殖活性,免疫细胞化学染色法检测各组软骨细胞的II型胶原（COL2）的表达情况,ELISA技术检测胰岛素生长因子1（IGF-1）、前列腺素E2（PGE2）的表达水平,RT-PCR和Western blot技术检测mTORmRNA表达水平和蛋白含量。结果：（1）免疫细胞化学染色：正常组软骨细胞内的COL2表达较LPS组高（P〈0.05）。（2）CCK-8：100uM吡格列酮对软骨细胞的增殖作用较1uM,10uM,50uM吡格列酮强（P〈0.05）。（3）ELISA：与LPS组相比,Pioglitazone组和LIPUS组的软骨细胞IGF-1表达水平均上升（P〈0.05）,并且LIPUS组较Pioglitazone组上升明显（P〈0.05）。与LPS组相比,LIPUS组和Pioglitazone组的软骨细胞PGE2表达水平明显下降（P〈0.05）;且Pioglitazone组PGE2水平较LIPUS组下降明显（P〈0.05）。（4）RT-PCR和Western blot：与LPS组相比,LIPUS组和Pioglitazone组的软骨细胞mTOR mRNA水平和蛋白含量明显下降（P〈0.05）,且Pioglitazone组mTOR mRNA水平和蛋白含量较LIPUS组明显下降（P〈0.05）。结论：LIPUS与吡格列酮可能通过IGF-1/mTOR/PGE2信号通路上调软骨细胞IGF-1的水平,下调PGE2和mTOR的表达,加强软骨细胞自我保护作用。
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