作者：黄晓东; 叶晓健; 王洋; 王伟恒; 徐立璋; ...终板软骨细胞总抗氧化能力衰老凋亡
摘要：目的 ：通过研究不同年龄大鼠的终板软骨细胞氧化应激的差异,探讨衰老对终板软骨细胞抗氧化能力的影响。方法：原代培养获取SD大鼠2个月、18个月来源的终板软骨细胞鉴定后,使用第三代细胞进行实验。实验分为两组,A组为2个月大鼠来源的终板软骨细胞,B组为18个月大鼠来源的终板软骨细胞。待A、B两组细胞贴壁后,通过β-半乳糖脱氢酶染色和RT-PCR对端粒酶长度进行检测,比较两组细胞衰老的差异;通过总抗氧化能力试剂盒检测两组细胞总抗氧化能力的不同。以浓度为200umol/L过氧化氢对细胞进行2.5h的处理,RT-PCR法检测处理前后两组细胞Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、caspase-3及B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,bcl-2）的m RNA表达情况,使用流式细胞仪检测两组细胞的凋亡情况。对Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、caspase-3及bcl-2的相对表达量进行组间t检验,P〈0.05为差异有统计学意义。结果 ：未使用过氧化氢处理时,A、B两组终板软骨细胞的在β-半乳糖脱氢酶染色、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖表达及凋亡率无明显差异（P〉0.05）,而B组在端粒酶的相对长度（T/S=10±2）及总抗氧化能力（0.72±0.18）较A组（T/S=135±5,1）显著降低（P〈0.05）。在相同条件的过氧化氢刺激后,B组终板软骨细胞的Ⅱ型胶原（0.60±0.16）、蛋白聚糖（0.75±0.22）表达明显低于A组细胞（P〈0.05）,而凋亡率显著高于A组细胞（P〈0.05）。结论 ：不同年龄大鼠终板软骨细胞衰老及抗氧化能力存在差异,衰老越明显的终板软骨细胞,总抗氧化能力越低,抵抗过氧化损伤的能力越差。
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