埃及伊蚊丝氨酸蛋白酶抑制蛋白基因家族的筛选和表达谱分析

作者：程金芝; 刘鉴; 翟慧; 吕清巧; 颜凤; 商正...埃及伊蚊丝氨酸蛋白酶抑制剂实时荧光定量pcr时空表达谱

摘要：目的 筛选并鉴定埃及伊蚊（Aedes aegypti）全基因组中的丝氨酸蛋白酶抑制蛋白（serine protease inhibitor,serpin）基因,分析其基因结构以及在不同发育时期和不同组织中的表达谱。方法 运用生物信息学方法在埃及伊蚊全基因组数据库中筛选并鉴定埃及伊蚊serpin基因家族,利用Vector NTI11.0软件进行同源性比对、保守性分析,采用MEGA7.0软件构建系统进化树。实时荧光定量PCR（q RT-PCR）检测埃及伊蚊不同发育时期（卵、Ⅰ~Ⅳ龄幼虫、蛹、雄蚊和未吸血雌蚊）,以及未吸血雌蚊不同组织（唾液腺、中肠、脂肪体和卵巢）的serpin基因表达变化。结果 从埃及伊蚊全基因组中筛选出26条serpin基因序列。生物信息学分析结果显示,19条具有信号肽,16条推测具有抑制酶活性。进化分析表明,埃及伊蚊serpin基因家族被分为A、B和C分支,B分支分为4组,每分支均具有同源性,且不同成员间在进化上相对保守。qRT-PCR结果显示,Aa SRPN25在雌蚊中特异性表达,相对表达量为0.074±0.015（P〈0.01）;Aa SRPN19~22在雄蚊中丰富表达;Aa SRPN23在Ⅰ龄幼虫时期特异性高表达,而且在唾液腺中也特异性高表达,相对表达量分别为22.9±5.28和4.24±1.39（P〈0.01）;Aa SRPN25在唾液腺中特异性高表达,相对表达量为74.44±25.76（P〈0.01）,Aa SRPN6、Aa SRPN14在中肠中的表达量最高,相对表达量分别为1.80±0.33、0.703±0.501;Aa SRPN17、Aa SRPN20在脂肪体中的表达量最高,相对表达量分别为0.34±0.09、0.15±0.03。结论 从埃及伊蚊全基因组中筛选出26条serpin基因序列,其中19条具有信号肽,16条推测具有抑制酶活性的作用。

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