猪囊尾蚴一种蛋白抗原基因的分子克隆

作者：刘殿武; 李文玲; 张丽梅猪囊尾蚴基因蛋白抗原核苷酸序列筛选红细胞表面抗原恶性疟原虫种蛋原基dna文库

摘要：目的从猪囊尾蚴cDNA文库中筛选出编码某种蛋白抗原的基因.方法提取猪囊尾蚴mRNA,经反转录合成cDNA,构建cDNA文库.以兔抗猪囊尾蚴多克隆抗体筛选cDNA文库,得到阳性克隆后,将其亚克隆到pBluescript SK质粒中,以载体臂上的通用引物采用双脱氧末端终止法测定插入片段的核苷酸序列,GENETYX软件分析核苷酸序列编码的氨基酸序列,在GenBank中进行核苷酸序列同源性检索.结果与结论经过3次筛选,从cDNA文库中筛选出一个长度为1 320bp的基因片段.此克隆的开放阅读框为1 260 bp,编码420个氨基酸,含有两个糖基结合位点.与GenBank中的基因进行同源性分析,其部分核苷酸序列与秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)红细胞膜内蛋白和恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)红细胞表面抗原高度同源.

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