作者：卢琴; 王红琳; 罗青平; 张腾飞; 汪宏才; ...鸭坦布苏病毒e蛋白原核表达反应原性
摘要：参照Gen Bank已发表的鸭坦布苏病毒序列,采用生物信息学分析并利用PCR方法从鸭坦布苏病毒湖北分离株（JL2011株）扩增出E基因全长片段（E1）及E基因截短片段（E2）,将含有双酶切位点的目的片段连接p ET-28a（＋）载体,成功构建出重组表达质粒p ET28a-E1和p ET28a-E2。将p ET28a-E转化BL21（DE3）后,经IPTG诱导可表达出约54.3 ku和44.8 ku的蛋白,但E2的表达量明显高于E1,故将筛选的E2包涵体进行纯化后,用坦布苏病毒阳性血清进行Western blot分析表明纯化后的重组蛋白具有良好的反应原性。研究为进一步阐明鸭坦布苏病毒E蛋白的功能及建立快速灵敏的鸭坦布苏病毒检测方法奠定基础。
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