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一种检测传染性喉气管炎病毒的夹心ELISA方法的建立

作者:张小荣; 张林; 刘怡; 黄海琼; 吴艳涛传染性喉气管炎病毒单克隆抗体夹心elisa

摘要:通过将传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白加基因78~600nt抗原编码区在大肠杆菌中进行高效可溶性表达,以重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术筛选获得2株特异性单克隆抗体4D6和7D9,经亚类鉴定均为IgGl,轻链为K链。经交叉配对试验,建立了以7D9为捕获抗体,以HRP偶联7D9(HRP-7D9)作为检测抗体的ILTV抗原检测夹心ELISA方法。经测定,该方法具有良好的特异性和敏感性,对ILTV抗原的最低检测限为10。TCID,0/mL。应用该方法对40份临床样品进行双盲测试,以PCR方法同步检测进行对照,结果显示两种方法之间的符合率为87.5%。

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