作者:陈燕梅; 连玲; 曲鲁江; 刘长军; 杨宁鸡马立克氏病毒mirna
摘要:本研究旨在建立一种检测马立克氏病毒人工感染鸡相关miRNA表达变化的RT-PCR方法,探讨该方法在miRNA定量检测方面的应用价值。试验选择6个具有典型肿瘤结节的马立克氏病毒感染脾脏样品作为研究材料,同时采用6个正常鸡的脾脏样品作为对照材料。利用特异的茎环反转录引物以及miRNA上下游引物对gga-miR-181a进行基于SYBR GreenⅠ的荧光定量PCR检测,并以U6为内参基因、2-ΔΔCt法检测gga-miR-181a的相对表达量。结果,在马立克氏病毒人工感染鸡的脾脏和正常鸡的脾脏中成功检测出gga-miR-181a-1的表达。证明茎环RT-PCR法能用于检测马立克氏病毒人工感染鸡的相关miRNA,并具有准确、快速、节约成本的优点。
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