作者：李芳芳 郭永 崔芳芳 丁宁 张嵘 邹检平脆性x综合征fmrp重组表达蛋白纯化
摘要：目的：在大肠杆菌中对脆性X智力低下蛋白（FMRP）进行重组表达，获得高产量及高纯度的可溶性重组蛋白。方法：以人脑cDNA文库为模板，PCR扩增FMRl基因后将其克隆至融合表达载体pGEX-6P-1中，重组载体转化进入大肠杆菌BL21（DE3）pLysS，并用IPTG进行诱导表达。应用谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B进行亲和层析纯化GST—FMRP融合蛋白，并以SDS—PAGE电泳和Western blot对融合蛋白的表达进行检测。结果：亲和纯化后的融合蛋白经FMRP及GST单抗分别进行Western blot鉴定为GST—FMRP融合蛋白。结论：大肠杆菌中FMRP IS010的重组表达产量高，纯化得到可溶性重组蛋白，为FMRP抗体的制备及FXS检测试剂盒的开发奠定基础。
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