作者：胡利华; 庞红艳; 李欣; 吴尔若; 马旭; 于...卵巢癌患者标志物鉴定研究特异blottingwestern血清结合珠蛋白肿瘤相关蛋白健康妇女蛋白质组分血清学诊断血清总蛋白elisa斑点印迹法蛋白鉴定电泳方法差异蛋白串联质谱液质联用蛋白序列亲和层析电泳分离
摘要：目的:通过分析卵巢癌患者血清中的蛋白质组分,寻找可能的肿瘤相关蛋白并对该蛋白鉴定,以期确定其作为卵巢癌血清学诊断的特异标志物.方法:采用双向凝胶电泳方法分离6例卵巢癌患者及2例正常健康妇女血清总蛋白,经考马斯亮蓝染色后对比找出差异蛋白斑点,该蛋白斑点经蛋白酶水解后进行液质联用串联质谱(LC-MS/MS)分析,用SEQUEST搜索软件查询Finngan公司提供的FASTA格式蛋白序列数据库.采用Western Blotting、ELISA、斑点印迹及亲和层析等方法对目标蛋白作进一步的分析.结果:经双向电泳分离,卵巢癌患者血清中有3～4个组分显示含量高于正常健康妇女血清,选其中最明显的一个差异斑点进行质谱分析,对库检索确定为结合珠蛋白.进一步的分析证实,卵巢癌患者血清中结合珠蛋白总含量有高于正常健康妇女的趋势.此外,通过凝集素斑点印迹法检测发现,岩藻糖基化结合珠蛋白成分明显增加是该蛋白总量增高的主要特性.结论:检测血清结合珠蛋白总量以及特异的岩藻糖基化组分可能成为卵巢癌的血清诊断指标之一,可与其它检测方法相结合,提高卵巢癌早期诊断的有效性.
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