作者:刘凡光; 李晓松; 顾瑛; 王雷; 戴维德; 丁...荧光图像图像采集激光扫描共聚焦显微镜初步比较设备荧光显微镜ecv304细胞图像对比度ccd细胞内图像质量荧光探针方法应用孵育时间成像质量荧光强度图像表现活性氧系统
摘要:目的通过对激光扫描共聚焦显微镜和CCD荧光显微镜采集的DCF探针荧光图像质量的比较,选择适合于快速变化荧光的图像采集设备.方法应用荧光探针H2DCF-DA孵育ECV 304细胞后(孵育浓度为10μmol/L,孵育时间30 min),分别利用激光扫描共聚焦显微镜和CCD荧光显微镜采集DCF荧光图像,并比较两者的成像质量.结果随着光照致活性氧的产生,DCF荧光的变化速度较快.激光扫描共聚焦显微镜采集的荧光图像表现为细胞内整体的DCF荧光强度增高,图像对比度稍差;而CCD荧光显微镜清晰地呈现细胞内的细节信息,准确地反映了细胞内DCF早期的分布位置.结论在采集快速变化的荧光图像时,CCD荧光显微镜系统优于激光扫描共聚焦显微镜系统.
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