作者：石正松 李强 宁寅宽 蔡伟良 李诗鹏骨组织工程人骨形态发生蛋白2股骨头坏死pcr荧光定量pcr免疫印迹
摘要：目的探究人骨形态发生蛋白-2（human bone morphogenetic protein-2,h BMP-2）基因植入兔股骨头坏死模型体内后的活性,为后续实验奠定理论基础。方法 1.采用髓芯减压联合液氮冰冻法制备兔股骨头坏死模型;2.将造模成功的兔子随机分为A、B、C3组（n=12）,A组不植入材料,为对照组,B、C组分别植入DBM/BMSCs、h BMP-2/BMSCs/DBM;3.术后第1、第2、第3周各组分别处死4只兔子,分别运用PCR、RTFQ-PCR、Western Blot检测股骨头内h BMP-2基因和蛋白的表达量,评估h BMP-2基因在兔体内的活性。结果植入后,在第1、第2、第3周,PCR结果示：A、B两组h BMP-2基因呈阴性表达,C组h BMP-2基因呈阳性表达;RTFQ-PCR示：C组相对表达量分别为1,0.947±0.025,0.895±0.059,P=0.081;Western blot示：A、B两组h BMP-2蛋白在兔体内呈阴性表达,C组h BMP-2蛋白呈阳性表达;凝胶成像系统分析显示：C组h BMP-2蛋白表达灰度值（目的/内参）分别为：0.530±0.056、0.507±0.066、0.475±0.086,且两两之间比较P〉0.05。结论 h BMP-2基因转染BMSCs植入兔股骨头坏死模型体内后能够稳定表达,进而能够持续诱导BMSCs向骨细胞分化,达到修复股骨头坏死的目的。
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