作者:肖新华; 周后德; 王运林; 张红; 袁凌青; ...成熟破骨细胞rankl单核细胞小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶激光共聚焦显微镜integrin骨吸收功能分化trap多核破骨细胞基因mrna细胞表型细胞形成生物学特征吖啶橙染色基因表达及
摘要:目的观察小鼠的单核/巨噬细胞RAW264.7的一般生物学特征及在RANKL诱导下形成成熟破骨细胞的特征.方法 RANKL诱导RAW264.7细胞6d后,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法观察TRAP阳性多核细胞,吖啶橙染色激光共聚焦显微镜(LCSM)观察多核细胞形态;诱导RAW264.7细胞9d后,RT-PCR检测RAW264.7细胞的破骨细胞表型和功能基因表达及其RANKL诱导后变化;诱导RAW264.7细胞12d后,钙磷覆盖的破骨细胞活性分析板观察破骨细胞的骨吸收功能.结果 RAW264.7细胞TRAP染色阴性,单核或2个核,能表达破骨细胞表型和功能基因,无骨吸收功能.RANKL可诱导RAW264.7细胞形成TRAP阳性成熟的多核破骨细胞,上调CathepsinK、CAⅡ、integrinβ3等基因mRNA的表达.结论 RAW264.7具有破骨细胞特征性基因表达谱,是一种较好的破骨前体细胞模型.RANKL可诱导RAW264.7细胞形成成熟破骨细胞.
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