作者：沈霖; 武嘉林; 李蕾; 夏远军; 高兰; 谢晶...阿胶强骨口服液含药血清护骨素配体胎鼠基因mrna表达ranklwistar大鼠mtt比色分析显著性差异颅骨成骨细胞新生sd大鼠成骨细胞增殖胸腺嘧啶核苷骨质疏松对照组单细胞悬液放免法测定pcr测定opg雌激素分子机制
摘要：目的研究阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL表达的影响,探讨阿胶强骨口服液治疗骨质疏松的分子机制.方法 3月龄Wistar大鼠(雌雄各半)30只,随机分为阿胶强骨口服液,雌激素,及生理盐水对照组,灌胃7d后,制备实验组和对照组的含药血清.将新生SD大鼠分离的颅骨成骨细胞,制成单细胞悬液,消化传代,取二代培养的成骨细胞,制成细胞悬液.培养细胞被分为5组,分别加同体积药液,对照组仅加培养液,继续培养.采用MTT比色分析、3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法测定成骨细胞增殖,用放免法测定细胞内BGP含量,RT-PCR测定胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL mRNA的表达.结果阿胶强骨口服液含药血清以剂量依赖方式促进成骨细胞的增殖,与对照组相比,差异显著(P＜0.05).成骨细胞OPG基因mRNA表达在阿胶强骨口服液含药血清100ml/L时最强,与雌激素组比较无显著性差异(P＞O05),且明显高于对照组(P＜O.05).成骨细胞RANKL基因mRNA表达在1000ml/L阿胶强骨口服液含药血清与雌激素组比较无显著性差异(P＜0 05),且明显低于对照组(P＜O.05).结论阿胶强骨口服液可在细胞水平上促进骨的合成代谢及前成骨细胞的有丝分裂,分子水平上调节OPG/RANKL表达而治疗骨质疏松.
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