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miRNA-181a/b通过血清反应因子调控血管平滑肌细胞表型

作者:侯雪; 魏晓星; 张振明; 蔺枭; 吴琼血清反应因子血管平滑肌细胞表型转化

摘要:目的研究miR-181a/b通过血清反应因子(SRF,serum response factor)对血管平滑肌细胞向合成型表型转化及细胞增殖迁移能力的调控作用。方法将miR-181a/b瞬时转染至人主动脉平滑肌细胞(HAo SMCs)中,用实时定量PCR、CCK-8检测方法和transwell实验分别检测平滑肌细胞的表型标记基因的表达水平、细胞增殖能力和迁移能力的变化。生物信息学分析预测miR-181a/b直接靶向血清反应因子的3’UTR(非编码区),并通过实时定量PCR、western blot及双荧光素酶报告系统分别验证。结果实时定量PCR结果表示在HAo SMCs中过表达miR-181a/b能够抑制收缩表型标记基因的表达,促进合成表型标记基因的表达,CCK-8与transwell实验结果表明,miR-181a/b可增强细胞的增殖和迁移能力。双荧光素酶报告系统与western blot结果表明,miR-181a/b能够直接作用SRF,抑制SRF的蛋白表达。结论 miR-181a/b通过直接作用血清反应因子的3’UTR促进平滑肌细胞由收缩型表型向合成型表型转化。

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中国高原医学与生物学

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