藏羚羊ET-1基因编码区的克隆与分析

作者：冯志超; 马兰; 白振忠; 格日力cdna克隆藏羚羊低氧适应

摘要：目的克隆藏羚羊内皮素1（endothelin-1,ET-1）基因编码区,并行分析。方法从藏羚羊肺组织中提取总RNA,通过RT-PCR法获得藏羚羊ET-1cDNA,将其与pGEM-T Easy载体连接构建重组质粒,经转化JM109菌扩增培养后鉴定阳性质粒并测序。将测序结果与NCBI数据库进行同源性比较。结果获得藏羚羊ET-1基因编码区序列,长度为609bp,编码202个氨基酸,将此序列提交GenBank数据库并取得注册号（JQ031153）。其核苷酸序列与绵羊、牛、猪、大鼠以及斑马鱼的同源性分别是：98%、95%、86%、81%、48%。推测出的氨基酸序列与绵羊、牛、猪、大鼠以及斑马鱼的同源性分别是：97%、94%、79%、76%、34%。与绵羊ET-1氨基酸比对发现,30位和172位的苏氨酸变为丙氨酸、40位和163位的缬氨酸变为丙氨酸、141位天冬氨酸变为天冬酰胺、181位的苯丙氨酸变为缬氨酸。结论成功克隆了藏羚羊肺组织中ET-1基因的编码区,分析发现藏羚羊ET-1基因对应的氨基酸发生了突变,这些为进一步揭示藏羚羊低氧适应分子机制打下基础。

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