shRNA干扰胃泌素基因表达对人胃癌细胞BGC823增殖和迁移能力的抑制作用

作者：刘燕; 耿排力; 吕有勇胃泌素shrna迁移能力增殖能力

摘要：目的构建针对人胃泌素基因的shRNA干扰表达载体，观察胃泌素基因表达抑制对人胃癌细胞系BGC823细胞增殖和迁移能力的影响。方法根据人胃泌素序列设计并构建3个靶向人胃泌素基因的shRNA真核表达载体，以脂质体转染的方法将胃泌素干扰质粒转染至人胃癌细胞系BGC823，经G418筛选出稳定转染的阳性细胞。通过RT—PCR技术筛选出表达抑制最强的稳定转染胃癌细胞系。应用流式细胞仪技术检测其细胞周期变化情况。采用Trans—well小室法检测细胞体外迁移能力。结果经测序证明胃泌素shRNA基因已成功插入Psilencer3．1质粒中，构建的干扰质粒能够显著抑制胃泌素的表达。胃泌素基因的表达下调将胃癌细胞阻滞在G1期，且穿过Trans—well小室膜的细胞数显著下降。结论干扰胃泌素的表达可显著抑制胃癌细胞的增殖和迁移能力。

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