作者:王玲; 王宏; 徐莘香; 王丽颖; 于永利胞外段基因细胞增殖分化原核表达载体western重组蛋白人结肠癌组织cdna克隆bl21大肠杆菌诱导表达blot稳定表达重组菌步研究nk转化序列
摘要:目的为了研究ULBP3刺激NK细胞增殖分化的功能,首先需构建、表达ULBP3胞外段重组蛋白.方法用RT-PCR方法从人结肠癌组织中钓取ULBP3胞外段基因,构建pET32a原核表达载体,转化大肠杆菌BL21,以IPTG诱导表达,Western blot鉴定.结果经测序证实,所获得的cDNA克隆为ULBP3胞外段基因,其序列与genebank中已经发表的序列完全一致,pET32a原核表达载体转化大肠杆菌BL21后,经筛选获得的阳性重组菌稳定表达ULBP3胞外段重组蛋白.结论成功表达了ULBP3胞外段重组蛋白,可用于进一步研究ULBP3刺激NK细胞增殖分化的功能.
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