作者:曹慧敏; 刘勇; 魏社鹏; 周范民; 赵建龙细菌感染生物素荧光计寡核苷酸芯片实验室技术和方法
摘要:目的研制一种用于快速检测急症常见感染细菌的芯片反应系统.方法应用生物信息学技术,设计检测细菌的探针和聚合酶链反应扩增引物,探针点制成寡核苷酸芯片,待测样本经扩增并标记生物素或CY5荧光素后与芯片杂交,再经链酶亲和素-碱性磷酸酶显色反应后,获得肉眼可见的杂交信号,或通过荧光检测仪读出样本的检测结果.结果建立了针对临床急症患者标本的非荧光法与荧光法芯片检测系统,芯片的检测灵敏度(大肠埃希菌)为10~100 CFU/反应体系.结论两种方法不仅能快速、灵敏地检测靶细菌感染,且重复性好、信号强及不易出现非特异信号.生物素酶联显色芯片法由于更为经济、简便而有重要的临床价值.
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