作者：赵俊华; 李伟刚; 杜田; 苏影; 汪海波; 涂...恒温热隔绝式pcr黄热病毒黄病毒现场检测
摘要：目的建立能在野外或现场应用的黄热病毒反转录恒温热隔绝式PCR(reverse transcription-insulated isothermal PCR,RT-iiPCR)快速检测方法。方法针对黄热病毒基因组5’UTR保守区设计检测引物和TaqMan-MGB探针,优化引物、探针、Taq酶、反转录酶和PCR增强剂等各组分的浓度,利用分析平台,建立黄热病毒RT-iiPCR检测方法,评价方法的稳定性、特异性、灵敏度和检测限等指标。结果建立了稳定可靠的黄热病毒RT-iiPCR检测方法,在分析平台上只需一键操作即可在58 min内完成检测并自动报告结果。性能评价试验显示该方法稳定性好,特异性和灵敏度分别达到100.00%和92.31%,检测下限≥1 000拷贝。结论率先建立了黄热病毒RT-iiPCR检测方法,该方法简便实用,适合于现场快速检测。
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