作者：徐蕾蕊; 魏海燕; 马丹; 汪琦; 张西萌; 李...ms2噬菌体过程质控品食源性病毒贝类
摘要：目的 研究MS2噬菌体作为过程质控品在贝类食源性病毒检测中的应用。方法 采用双层琼脂培养法制备MS2噬菌体悬液,计算效价;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）检验其稳定性;比较3种RNA提取方法的提取效率,确定M S2噬菌体的最适添加量范围;分析M S2噬菌体添加对贝类食源性病毒检测的影响。结果 稳定性研究表明-20℃和-80℃28 d MS2噬菌体（悬液的效价浓度为7.13×1011pfu/m L）时RNA含量无明显变化[t=0.464,P=0.653（-20℃）;t=0.602,P=0.561（-80℃）]。MS2噬菌体最适添加量范围为7.13×108~7.13×107pfu/m L。在最适添加范围内,试剂盒方法和Trizol裂解结合磁珠纯化方法回收率均〉1%。2种阳性样品均被检出,其Ct值比较接近,M S2噬菌体对贝类食源性病毒检测无影响（t=0.170,P=0.873）。结论M S2噬菌体可作为贝类食源性病毒qRT-PCR检测的过程质控品,是监控假阴性结果的一种简便有效的方法。
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