作者：孙雪飞 裴艳涛 杨国涛 吴铭生 尹秋伟藤梨根提取物食管肿瘤细胞凋亡bax基因细胞内钙离子浓度
摘要：目的观察藤梨根乙酸乙酯提取物对食管癌EC109细胞生长、凋亡影响,并探讨其作用机制。方法体外培养食管癌EC109细胞,分别给予不同浓度的藤梨根乙酸乙酯提取物进行干预,四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测用药后EC109细胞凋亡率变化,免疫组化法检测用药后EC109细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达变化,激光共聚焦显微技术测定用药后EC109细胞胞内[Ca2＋]i变化。结果细胞培养24、48、72 h后,对照组细胞凋亡率分别为（1.67±0.76）%、（2.32±0.45）%、（2.98±0.89）%,Bcl-2蛋白表达率分别为（50.12±3.41）%、（49.78±5.65）%、（51.25±6.34）%,Bax蛋白表达率分别为（17.98±2.85）%、（18.27±3.12）%、（17.76±3.64）%,而各干预组细胞凋亡率为7.05%～51.11%,均明显增加（t=5.419～17.826,P〈0.05）,存在时-效和量-效趋势,同时其细胞Bcl-2蛋白表达降低,为43.32%～10.46%,Bax蛋白表达上调,为24.54%～63.47%,均存在时-效和量-效趋势,当作用时间≥48 h或浓度≥100μg/mL时,干预组上述变化与对照组比较,差异有统计学意义（Bcl-2：t=3.58～10.14;Bax：t=5.047～11.065,P〈0.05）;用药后细胞内[Ca2＋]i明显升高,12 h达高峰,此后缓慢减低,至48 h仍明显高于对照组。结论藤梨根乙酸乙酯提取物可以明显抑制食管癌EC109细胞增殖,并诱导细胞发生凋亡,可能与降低其Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,升高细胞内[Ca2＋]i有关。
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