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两种方法提取毛干mtDNA并研究其HVSⅠ的多态性

作者:李维丽; 陈雪云; 崔杨程; 王一航; 程宝文法医物证学异质性提取线粒体dna人头发测序

摘要:目的通过比较两种方法提取毛干线粒体DNA(mtDNA)的提取效率并探究其高变区Ⅰ(HVS-Ⅰ)遗传多态信息,以发挥此类检材在案件侦破中的作用。方法收集8名随机个体3-5cm长毛干各2份,分别使用M48磁珠法和QIA Investigator硅膜法提取模板DNA;同时收集8名个体的少量指甲,用QIA Investigator试剂盒法提取模板DNA。巢式PCR或普通PCR扩增HVS-Ⅰ片段,扩增产物用G-50胶纯化,电泳后进行测序。结果磁珠法和硅膜法均能获到模板DNA,QIA试剂盒法提取的模板DNA普通PCR即可扩增出目标片段,磁珠法提取的模板DNA需经过巢式扩增得到目标产物。同一个体的头发和指甲测序结果相同,未检见异质性。8个个体测序比对结果显示序列以转换多态为主,2个样本出现颠换多态。结论硅膜法可作为提取毛干DNA的有效方法。

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