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基于重组质粒制备STR分型阳性参照物

作者:武波; 王乐; 郭磊; 王峰; 陈曼; 刘毅成; ...法医物证学短串联重复序列重组质粒阳性参照物

摘要:目的基于重组质粒制备可用于校准法医STR分型的阳性参照物。方法 以常用阳性参照物9948人类基因组DNA STR分型为依据,基于重组质粒构建包含CSFlPO、D7S820、TH01等40个常染色体位点,DYS39l、DYS522、DYS385a/b等22个Y染色体位点以及性别判定基因座Amelogenin的STR分型阳性参照物。将重组质粒定量、稀释后等比例混合,分别应用于DNATyper。19、DNATyper24、DNATyper/,AmpFSTIdentifiler。Plus以及PowerPlex。18D System五种扩增试剂盒。结果 阳性参照物中各重组质粒浓度为0.Olpg/μL~0.001pg/μL;应用于AmpFtSTRIdentifilerPlus PCR扩增试剂盒,基于重组质粒制备的阳性参照物与人类基因组DNA扩增检测结果差异较小;将此阳性参照物分别应用于不同公司、不同STR基因座的四种STR扩增试剂盒,电泳检测图谱显示各基因座基因型完整,分型正确,峰高相当,基因座间均衡性良好。结论基于重组质粒制备STR分型阳性参照物,是一种可以替代细胞系制备阳性参照物的方法,具有一定的参考价值。基于此方法制备的阳性参照物可适用于市面上常用的STR检验试剂盒,普适性较强,对法医DNA分型检测有一定的实用价值。

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