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磁珠法回收纯化DNA样本

作者:杨百全; 王利君; 遇长青; 李晨旭; 杨文胜...法医物证学磁珠法dna回收纯化复合扩增

摘要:DNA回收纯化技术是法医DNA检验的关键技术之一。目前,国际上采用的方法主要有基于吸附解离原理的磁珠法[1,2]、硅珠法[3~6]和基于分子量差异的柱法[7]、滤膜法[8]。相比之下,磁珠法由于将磁场作用引入生物分离过程,简化了手工操作步骤,节省了时间,对DNA样本的回收和纯化具有特殊的优势。本文采用吉林大学化学学院赠送的磁珠,在DNA回收纯化方面进行了一些探索。1材料与方法1.1样本DNA标准品9947A购自Promega公司;其他样本取自本实验室的案件检材。1.2主要仪器设备及试剂3100型基因分析仪(AB I公司);9700型PCR扩增仪(AB I公司);Powerplex16 System复合扩增试剂盒(Promega公司);国产磁珠(吉林大学化学学院赠送);硅珠(Sigma公司)1.3 DNA回收纯化国产磁珠法取不同量的标准DNA(9947A)、生理盐水稀释60倍的新鲜血液及实际案件检材,按照《DNA半定量提取试剂盒》说明书方法提取DNA,调整加入磁珠的量为5μl,提取物溶解于20μl高纯水中。硅珠法取不同量的标准DNA(9947A),按照文献方法进行提取,提取物溶解于20μl高纯水中。DNA-IQ...

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