作者：范幸; 周燕飞; 祖月娥小干扰rnahpve7蛋白细胞周期细胞凋亡
摘要：目的通过小干扰RNA（siRNA）抑制宫颈癌Hela细胞中人乳头瘤病毒（HPV）18型E7的表达,研究E7蛋白对Hela细胞的生物学特性和miR-204表达的影响和关系,探索HPV致癌的分子机制。方法设计合成靶向HPV18型E7基因的siRNA,转染Hela细胞,抑制HPV18-E7的表达;采用RT-PCR和Western blot分别检测Hela细胞中HPV18-E7的mRNA和蛋白水平,用流式细胞术检测Hela细胞的细胞周期和凋亡,通过荧光实时定量PCR检测miR-204的表达水平。结果 pRNAT-HPVE7与两个对照组比较,明显抑制了Hela细胞HPV18-E7的mRNA（t值分别为2.69、2.46,均P〈0.05）和蛋白（t值分别为3.93、4.20,均P〈0.05）的表达,细胞周期趋于正常,凋亡率增高（t值分别为-6.87、-6.92,均P〈0.05）,miR-204表达水平也明显升高（t值分别为0.26、0.22,均P〈0.05）。结论抑制HPV18-E7基因的表达能改变Hela细胞的生物学特性和上调miR-204表达。
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