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转录因子C/EBP-β调节人子宫内膜基质细胞蜕膜化作用机理研究

作者:刘杰; 郑洁; 黄凯; 章汉旺sirna蜕膜化细胞周期p57

摘要:目的探讨转录因子C/EβP—β调节人子宫内膜基质细胞蜕膜化的作用机制。方法采用8-Br—cAMP和MPA方法对人子宫内膜基质细胞体外蜕膜化实施处理分析,并通过瞬时转染方法调节转录因子C/EBP—β表达,然后分别收集蜕膜化处理不同时间及干扰前后的细胞,利用流式细胞仪检测细胞蜕膜化不同时间细胞分期的改变情况以及干扰前后细胞周期的变化,并采用Western blot和荧光定量实时PCR法(RT—PCR)分别在mRNA水平和蛋白质水平下检测细胞周期蛋白p57在转染siRNA组和对照组中的表达情况。结果子宫内膜基质细胞在体外蜕膜化中S期细胞的比例随着细胞蜕膜化时间的增长而减少,而G0/G1期细胞的比例随着细胞蜕膜化时间的增长呈现明显的上升趋势,G2/M期细胞的比例随着细胞蜕膜化时间的增长而显著下降,差异均有统计学意义(P〈0.05);而转染C/EBP—β siRNA后再蜕膜化48h后的S期细胞比例变化范围为4.28%-6.88%,差异有统计学意义(P〈0.05);G0/G1期细胞比例范围为86.07%~87.34%,G2/M期细胞比例范围为7.04%~8.38%,均呈逐渐下降趋势,但差异无统计学意义(P〉0.05);且转染C/EBP—β siRNA以后,对人子宫内膜基质细胞中细胞周期蛋白p57的表达进行检测分析,发现p57的表达有明显的下降趋势,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论转录因子C/EBP—β在人子宫内膜基质细胞蜕膜化过程中通过调节细胞周期蛋白p57使细胞脱离其周期而分化为一种新的蜕膜细胞,在蜕膜化过程中发挥重要作用。

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