作者：李锦成; 骆振华短发夹rnarna干扰
摘要：目的：研究DENN—SV基因在人乳腺癌细胞系MCF-7中抗凋亡作用的可能机制。方法：将前期试验筛选出的含最佳靶点序列的菌株扩增并抽提质粒，将实验分为空白组、空白载体转染组及最佳靶点组。将实验分为两组，每组分为空白组、空白载体转染组及最佳靶点组，一组转染后48h给予TRAIL25ng／ml处理4h，另一组不予TRAIL处理：收集细胞，采用流式细胞技术检测细胞凋亡率，采用Elisa法测定细胞裂解液中NF—κB含量，采用EMSA法检测核蛋白样品中NF—κB活性。结果：流式细胞仪检测TRAIL诱导凋亡效果增强，与空白组、阴性对照组相比较差异具有统计学意义（P〈0．05）；Elisa检测NF—κB结果示实验组的NF—κB表达量显著降低差异有统计学意义（P〈0．05），EMSA检测NF—κB结果示实验组的NF—κB活性减弱差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：干扰DENN—SV基因的表达后，给予TRAIL处理可引起MCF-7细胞的凋亡率增高。这种现象的机制可能与NF—κB活性有关，且该现象与NF—κB的关系与TRAIL的作用没有直接联系。
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