作者：陈瑶; 丁雯; 牟霞; 胡妮娅; 李明; 吴英松wfdc2启动子荧光素酶卵巢癌细胞
摘要：目的：构建WFDC2启动子荧光素酶报告基因重组质粒PGI3-WFDC2-Promoter，并进行功能鉴定。方法：通过PCR的方法，从H08910细胞基因组DNA中获得WFDC2基因编码序列上游的WFDC2启动子序列；软件分析WFDC2启动子的结构，选取调控密集区域，克隆到报告基因pGL3载体上，构建WFDC2启动子的报告基因载体；用脂质体转染法将2个报告基因载体分别转染至卵巢癌H08910细胞系；采用双荧光素酶报告基因系统评估WFDC2启动子活性。结果：PCR方法成功钓取WFDC2启动子片段，测定其编码序列及读框正确，酶切鉴定亚克隆序列正确，瞬时转染H08910后经报告基因检测，两段启动子均具有转录活性。结论：成功构建了WFDC2启动子的报告基因载体，为进一步研究WFDC2启动子和卵巢癌的关系奠定了实验基础。
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