作者：吴景华; 王海欣a组轮状病毒vp7
摘要：目的：利用RT-PCR法从A组轮状病毒扩增基因片段VP7,再将产物重组于大肠杆菌pMD18-T载体,探讨pMD18-T作为A组轮状病毒VP7基因克隆载体的应用。方法：提取A组轮状病毒总RNA,通过RT-PCR扩增,获得目的基因片段VP7,进行分离纯化和回收,最后把纯化的VP7基因与pMD18-T载体进行连接,进行质粒抽提与鉴定。结果：成功将VP7基因连接到pMD18-T载体,转化感受态菌（DH5α）,通过蓝白斑筛选得到DNA阳性重组子（载体＋VP7基因片段）,经DNA测序鉴定正确。结论：成构建功A组轮状病毒外壳蛋白VP7基因克隆载体,为进一步获得大量VP7基因以及研究和开发轮状病毒基因工程疫苗奠定基础。
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