作者：杜鹃; 陈爱平; 宋旭霞egfr基因skov3rna干扰
摘要：目的：利用RNA干扰技术抑制卵巢癌细胞株skov3细胞表皮生长因子受体（EGFR）的表达及细胞的体外增殖活性。方法：根据EGFR mRNA序列设计特异性siRNA插入序列，体外合成该序列后将其定向克隆入线性化质粒pSilencer^TM2．1-U6 neo，以HifectinⅡ真核转染试剂将重组质粒转染至skov3细胞中，用RT-PCR和免疫细胞化学方法分别鉴定转染前后EGFR基因在mRNA和蛋白水平表达的变化；四甲基偶氮唑蓝法（MTT）测定转染前后细胞增殖活性的改变。结果：DNA测序证实EGFR siRNA表达载体的siRNA插入序列完全正确，该表达载体可特异性抑制EGFR基因的表达；转染后细胞的增殖受到抑制，其中第5天的抑制率达到30％（P〈0．05）。结论：靶向EGFR的序列特异性siRNA真核表达载体可有效抑制skov3细胞中EGFR基因的表达和细胞的增殖。
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