作者：许慧芳; 黎逢光; 陈红; 焦淑洁; 张苏明人胚胎干细胞条件培养基无饲养层培养
摘要：目的：建立两株中国人胚胎干细胞（hESCs）的无饲养层的培养体系，观察条件培养基所需的饲养层密度，并探索最佳的传代方式。方法：两株人胚胎干细胞hES-846XX和hES-1846XY分别使用不同密度（3×10^5／mL、6×10^5／mL和1．2×10^6／mL）获得的条件培养基（CM）在无饲养层培养体系培养12代以上，用机械分离法和Ⅳ型胶原酶法进行传代，观察比较结果并对所得hESCs鉴定。结果：6×10^5／mL～1．2×10^6／mL之间的密度都是合适密度；Ⅳ型胶原酶在长期传代中优于机械法传代；所得细胞维持干细胞未分化状态和全能性。结论：无饲养层的培养体系可以用于中国胚胎干细胞培养，两株中国人胚胎干细胞（hESCs）的倍增周期、所需饲养层密度及分化率等方面与国外hESCs有明显差别。
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