作者：王桂兰; 鲁继荣逆转录病毒载体逆转录聚合酶反应基因重组真核表达
摘要：目的：构建具有拮抗IL-4作用的IL-4变异体（IL-4RA）的真核表达载体，并通过真核细胞表达变异蛋白。方法：设计突变引物，从小鼠的PBMC细胞提取总RNA，RT—PCR方法扩增目的片断，将该片断构建在真核表达载体上，并在真核细胞BHK-21中表达，通过Elisa方法检测IL-4变异体蛋白的表达。结果：通过测序分析及限制性酶切鉴定，采用RT—PCR成功的完成了IL-4RA的扩增和表达载体的构建，重组载体转染真核细胞后在上清中检测到IL-4RA的表达。结论：经构建含有目的基因（IL-4RA）的逆转录病毒载体，能够成功的在真核细胞BHK-21中表达出IL-4RA。
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