作者:程洪艳; 冯捷; 崔恒; 成夜霞; 付天云; 昌...单克隆抗体卵巢癌无血清培养基抗体生产培养上清杂交瘤细胞抗体生成纯化工艺细胞生长单抗
摘要:目的建立体外无血清培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体的方法,并进行纯化工艺的探讨,为规模化抗体生产奠定基础。方法以卵巢癌单克隆抗体杂交瘤细胞18382为研究对象,通过与常规的有血清培养法比较,研究了无血清培养基H-SFM中杂交瘤细胞的生长特性、抗体分泌效率、活性,用Supper-Spinner搅拌瓶进行了放大培养并用Protein A亲和层析法对无血清培养上清中抗体的纯化工艺进行了探索。结果183B2能够直接适应无血清培养基,不需要驯化;抗体生成约4d达到高峰,抗体产量可达50mg/L/10^6个细胞,无血清培养基中细胞生长及单抗的产量与效价与有血清培养的相比没有明显差别。用1 L Supper-Spinner搅拌瓶无血清放大培养183B2细胞成功,培养上清经Protein A亲和层析纯化,蛋白产率约10mg/L培养上清。结论本研究初步成功探索了卵巢癌单克隆抗体细胞183B2的无血清培养方法和抗体提纯工艺,为进一步大规模抗体生产提供了实验依据。
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