RNAi干扰Twist基因对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株增殖与侵袭力及E-钙黏蛋白甲基化的影响

作者：孙志宏; 齐莹喉鳞状细胞癌rnai干扰twist基因侵袭力

摘要：目的探讨RNAi干扰Twist基因对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株增殖、侵袭力及E一钙黏蛋白甲基化的影响。方法培养人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株，分别转染siRNA—Twist（siRNA—Twist组）、阳性对照siRNA—GAPDH（阳性对照组）和阴性对照错义链（阴性对照组），利用实时荧光定量PCR技术检测各转染组细胞中Twist和E—cad基因表达，Westernblot法检测各转染组细胞中Twist和E—cad蛋白表达，MTr比色法检测各转染组细胞增殖情况，Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力，甲基化特异性聚合酶链式反应（MSP）检测不同转染组细胞中E-cad甲基化表达。结果siRNA—Twist组细胞中TwistmRNA和Twist蛋白表达量均低于阳性对照组和阴性对照组，差异均具有统计学意义（P〈0．05）；siRNA—Twist组细胞中E-cadmRNA和E-cad蛋白表达量均高于阳性对照组和阴性对照组，差异均具有统计学意义（P〈0．05）；与阳性对照组和阴性对照组相比，siRNA-Twist组细胞转染48h-96h时细胞增殖能力明显减弱，差异均具有统计学意义（P〈0．05）；siRNA—Twist组细胞迁移细胞数和侵袭细胞数均低于阳性对照组和阴性对照组，差异均具有统计学意义（P〈0．05）；MSP检测结果显示，siRNA-Twist组细胞中E-cad甲基化扩增条带呈弱阳性，表达强度显著低于阳性对照组和阴性对照组，而非甲基化扩增条带呈阳性。结论特异性抑制Twist基因表达可能通过影响E-cad甲基化而上调E—cad表达，从而抑制细胞增殖及侵袭能力，有望为喉鳞状细胞癌基因治疗提供新的靶点。

注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社