作者:吴娟; 秦晓冰; 单虎绿脓杆菌鞭毛蛋白酸解法机械振荡
摘要:本试验以水貂绿脓杆菌PASD03株为研究对象,对其鞭毛蛋白的提取方法进行研究,分别通过酸裂解、差速离心以及酸裂解结合机械振荡三种方法,用(NH4)2SO4盐析来获得鞭毛蛋白,采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对提取的绿脓杆菌鞭毛蛋白进行分离纯化,并进行电镜鉴定。结果显示:成功分离出水貂绿脓杆菌的鞭毛蛋白,获得了绿脓杆菌鞭毛蛋白的初提液.绿脓杆菌鞭毛蛋白经SDS-PAGE提示纯化的鞭毛蛋白为一条相对分子质量(Mr)为53×103蛋白带,透射电镜(SEM)观察发现该鞭毛蛋白呈丝状。结论:经酸裂解法并结合机械振荡和硫酸铵沉淀法简便、耗时短、纯度高、产量高,适用于绿脓杆菌鞭毛蛋白的提取。
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