作者:杜凯; 李树清; 陈志飞; 周艳琴; 王贵强; ...边缘无浆体msp5原核表达纯化
摘要:目的:克隆边缘无浆体MSP5基因,构建重组质粒,并进行表达与鉴定。方法:根据GenBank公布的边缘无浆体MSP5基因序列(AY714547)设计一对引物,无菌颈静脉采集边缘无浆体阳性的牛血,用PCR方法从4血的DNA模板中扩增MSP5基因582bp的片断。将该片段克隆到原核表达载体pGEX-KG中。构建原核表达载体KG-MSP5,转化BL21,经IPTG的诱导表达蛋白。利用BugBuster GST Bind Purification Kit将其纯化,经Western blotting进行分析。结果:重组质粒KG-MSP5,转化B121,在IPTG的诱导下表达大小约46kPa蛋白。western blotting分析表明其具有很好的免疫原性。结论:本研究为边缘无浆体的血清举诊断试剂金的研制蕈定了篡础.
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