作者：包正阳; 孙振; 李丽华; 王小东; 宋娟; 邵...晚期糖基化终末产物受体胆固醇外流血管平滑肌细胞泡沫细胞形成
摘要：目的研究Nε-羧甲基赖氨酸（CML）对平滑肌细胞泡沫化中脂质外流的影响,探讨其在促进平滑肌细胞泡沫化中的作用和机制。方法使用组织贴块法从C57BL/6J小鼠主动脉中提取原代血管平滑肌细胞并进行鉴定;将第3~9代的原代平滑肌细胞分为对照组,氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）（50 mg/L）模型组,1、10、100μmol/L的CML与ox-LDL共刺激组,通过NBD-胆固醇流出实验检测CML对泡沫细胞胆固醇流出率的影响,通过胆固醇含量测定试剂盒测定细胞内总胆固醇（TC）、游离胆固醇（FC）和胆固醇酯（CE）水平;将原代血管平滑肌细胞分为四组：对照组、ox-LDL模型组、ox-LDL＋CML组、RAGE siRNA沉默组（ox-LDL＋CML＋siRAGE组）并进行刺激,通过Western blot检测糖基化终末产物受体（RAGE）和胆固醇流出调节子ABCA1的表达;通过油红O染色和油红萃取实验检测各组平滑肌细胞泡沫化程度。结果与对照组相比,不同浓度CML明显升高平滑肌细胞内TC、CE和FC的含量;胆固醇流出实验表明胆固醇流出率随CML浓度升高而降低;Western blot实验表明与对照组相比,加入CML后RAGE明显升高,ABCA1明显降低,ox-LDL＋CML＋siRAGE组RAGE的表达降低,并且ABCA1降低水平减少;油红O染色显示ox-LDL能够促使平滑肌细胞内脂质蓄积,CML能够增强其作用,抑制RAGE表达后CML作用减弱。结论 CML通过RAGE抑制脂质外流,促进平滑肌细胞源性泡沫细胞形成。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
