作者：贾秀红 孝飞飞 李建厂apollon基因rna干扰川芎嗪白血病k562细胞
摘要：目的观察Apollon siRNA靶向沉默Aollon基因联合川芎嗪（TMP）对人慢性粒细胞白血病细胞株K562增殖及凋亡的影响。方法根据前期实验筛选出的干扰效果最佳的Apollon siRN段，构建pGPHI-GFP-Neo-Apollon真核表达载体，并将构建成功的载体转染至K562细胞。将实验分为细胞对照组（未行任何处理）、阴性对照组（转染阴性质粒载体）和RNA干扰组（转染pGPHI—GFP-Neo-Apollon质粒载体），利用RT-PCR法和细胞免疫荧光法分别检测各组细胞Apollon mRNA及蛋白的表达情况；再于上述分组基础上新增TMP组（施加320gg／mLTMP）、TMP＋阴性对照组和TMP＋RNA干扰组，应用MTr法和流式细胞术分别检测各组K562细胞的增殖能力和细胞凋亡率。结果构建的pGPHI-GFP-Neo-Apollon载体能在K562细胞内稳定表达；RNA干扰组Apollon mRNA及其蛋白的相对表达水平明显低于细胞对照组和阴性对照组（均P〈0．05）；RNA干扰组K562细胞的增殖抑制率和凋亡率高于细胞对照组（P〈0．05），与RNA干扰组及TMP组比较，siRNA转染联合TMP能显著提高K562细胞的增殖抑制率和凋亡率（均P〈0．05）。结论Apdlon siRNA转染能显著抑制K562细胞增殖并促进其凋亡，且与TMP联合使用对提高K562细胞的增殖抑制率和凋亡率具有显著协同作用，提示siRNA技术联合药物在白血病治疗中具有重要的潜在价值。
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