作者：张晓敏; 李昌荣; 陈铭珍; 谭建新; 陆羡培养心肌细胞缺氧缺糖细胞凋亡
摘要：目的心肌细胞凋亡是许多心血管疾病发生与演变的细胞学基础,成为心血管疾病研究中的一个热点问题.国内外研究表明心肌缺血后再灌注可导致心肌细胞凋亡,但缺血是否引起心肌细胞凋亡尚有争议.该研究旨在探讨心肌缺氧损伤时是否发生心肌细胞凋亡.方法取2～4 d的新生SD乳鼠心室肌进行心肌细胞培养,采用模拟"缺血模型",分不同时间段缺氧缺糖组和正常对照组观察,用Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术(Flow cytomeutry,FCM)、Hoechst/PI荧光染色镜检判断细胞凋亡.用原子吸收法测定细胞内钙、镁含量.结果FITCAnnexin V/PI双染色法FCW检测,缺氧11.5,12.5,13.5和14.5 h早期凋亡细胞比例分别为(10.7±0.45)%,(13.7±0.71)%,(15±0.54)%和(17.2±0.67)%,比正常对照组(3.57±0.26)%明显增高,差异有显著性(P＜0.01);Hoechst/PI染色计数心肌细胞凋亡指数,缺氧11.5,14.5 h分别为18±2.4,25±3.8高于正常对照组3.75±0.96,差异有显著性(P＜0.01);缺氧缺糖各组与对照组相比心肌细胞内钙含量高、而镁含量低,差异有显著性(P＜0.05),但不同时间段缺氧缺糖心肌细胞内钙、镁含量变化差异无显著性(P＞0.05).结论在缺氧缺糖模拟"缺血模型"上发现缺氧缺糖可引起心肌细胞凋亡,细胞内钙超负荷和镁含量下降与凋亡发生有关.
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