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低氧对新生猪G1/S期肾小管上皮细胞增殖周期的影响

作者:沈青; 姚裕家; 熊英; 王峥; 杨欣伟; 曹玉...肾小管上皮细胞低氧新生猪

摘要:目的围生期肾小管上皮细胞(RTEs)急性损伤是否与窒息所致肾组织早期低氧环境直接相关,始终是国内外学术界争论的焦点.该实验以处于细胞增殖周期关键性调控点G1/S界面的RTEs作为体外低氧损伤的靶细胞,进行低氧对G1/S细胞增殖周期影响的研究,拟探讨低氧与RTEs急性损伤的关系.方法以新生猪G1/S期RTEs作为研究对象,采用氰化钠体外低氧损伤制成细胞缺氧模型(缺氧组),同时设干预组(斑螯素+氰化钠)和未处理对照组.应用流式细胞术DNA检测法,比较缺氧组、干预组和对照组细胞在恢复0,60,120,180 minG1、S期细胞分布率以及凋亡细胞比率,同时应用免疫细胞化学比较三组细胞p21的表达.结果恢复0,60 min,缺氧组S期细胞分布率明显低于干预组(1.4%±25%vs98.3%±1.6%;0.5%±0.9%vs99.0%±1.0%:P<0.01);在恢复120、180 min缺氧组凋亡细胞的比率(33.6%±0.8%,37.5%±1.2%)明显高于干预组(20.9%±1.7%,22.5%±1.1%)和对照组(25.6%±1.1,23.6%±1.4%)(均P<0.01);G1期细胞分布率与相应细胞内p21的表达呈正线性关系(r=0.64,P<0.01),而与凋亡细胞比率则无相关关系(r=0.342,P>0.05).结论围生期RTEs急性损伤与低氧密切相关,其机制可能与低氧抑制G1/S期RTEs增殖周期的转化,增加S期细胞凋亡相关.

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